Biosharp、DAPI染色試劑 即用型

產(chǎn)品簡介：
dapi染色液(dapi staining solution)是適用于常見細(xì)胞和組織細(xì)胞核染色的染色液。dapi即2-(4-amidinophenyl)-6-indolecarbamidine dihydrochloride，也稱dapi dihydrochloride，分子式為c16h15n5•2hcl，mw為350.25，cas:28718-90-3。
dapi是一種可以穿透細(xì)胞膜的藍(lán)色熒光染料，它可以用于活細(xì)胞和固定細(xì)胞的染色。和eb(ethidium bromide)相比，對(duì)雙鏈dna的染色靈敏度要高很多倍，dapi和雙鏈dna結(jié)合后可以產(chǎn)生比dapi自身強(qiáng)20多倍的熒光。dapi染色常用于細(xì)胞凋亡檢測(cè)，染色后用熒光顯微鏡觀察或流式細(xì)胞儀檢測(cè)。dapi也常用于普通的細(xì)胞核染色以及某些特定情況下的雙鏈dna染色。dapi的*大激發(fā)波長為340nm，*大發(fā)射波長為488nm；dapi和雙鏈dna結(jié)合后，*大激發(fā)波長為364nm，*大發(fā)射波長為454nm。dapi的發(fā)射光為藍(lán)色，且dapi和綠色熒光蛋白gfp或texas red染劑(紅色熒光染劑)的發(fā)射波長僅有少部分重疊，可以利用這項(xiàng)特性在單一的樣品上進(jìn)行多重?zé)晒馊旧?br> 本dapi染色液為即用型，濃度為10ug/ml，可以直接用于固定細(xì)胞或組織的細(xì)胞核染色。
使用方法:
1、對(duì)于細(xì)胞或組織樣品，固定后，適當(dāng)洗滌去除固定劑。隨后如果需要進(jìn)行免疫熒光染色，則先進(jìn)行免疫熒光染色，染色完畢后再按后續(xù)步驟進(jìn)行dapi染色。如果不需要進(jìn)行其它染色，則直接進(jìn)行后續(xù)的dapi染色。
2、對(duì)于貼壁細(xì)胞或組織切片，加入少量dapi染色液，覆蓋住樣品即可。對(duì)于懸浮細(xì)胞，至少加入待染色樣品體積3倍的染色液，混勻。
3、室溫放置3-5分鐘。
4、吸除dapi染色液，用tbst、pbs或生理鹽水洗滌2-3次，每次3-5分鐘。
5、直接在熒光顯微鏡下觀察或封片后熒光顯微鏡下觀察。細(xì)胞發(fā)生凋亡時(shí)，會(huì)看到凋亡細(xì)胞的細(xì)胞核呈致密濃染，或呈碎塊狀致密濃染。
注意事項(xiàng)：
1、本dapi染色液的濃度經(jīng)過優(yōu)化，確?？梢詽M足各種常規(guī)染色的需要。
2、熒光染料都存在淬滅的問題，建議染色后盡量當(dāng)天完成檢測(cè)。
3、為減緩熒光淬滅可以使用抗熒光淬滅封片液。
4、dapi對(duì)人體有一定刺激性，請(qǐng)注意適當(dāng)防護(hù)。
保存條件：
-20℃避光保存，一年有效。