微生物檢測(cè)公司- 武漢世紀(jì)久海公司(圖)

（4）需用特殊方法制備供試液的供試品
膜劑供試品 取供試品，剪碎，加ph7.0無(wú)菌氯化鈉-蛋白胨緩沖液，或ph7.2*鹽緩沖液，或胰酪大豆胨液體培養(yǎng)基，浸泡，振搖，制成1：10的供試液。若需要，調(diào)節(jié)供試液ph值至6～8。必要時(shí)，用同一稀釋液將供試液進(jìn)一步10倍系列稀釋。
腸溶及結(jié)腸溶制劑供試品 取供試品，微生物檢測(cè)公司，加入ph6.8無(wú)菌*鹽緩沖液（用于腸溶制劑）或ph7.6 無(wú)菌*鹽緩沖液（用于結(jié)腸溶制劑），置45℃水浴中，振搖，使溶解，制成1：10的供試液。必要時(shí)，用同一稀釋液將供試液進(jìn)一步10倍系列稀釋。
氣霧劑、噴霧劑供試品 取供試品，置-20℃或其他適宜溫度冷凍約1小時(shí)，取出，迅速消毒供試品開(kāi)啟部位，用無(wú)菌鋼錐在該部位鉆一小孔，放至室溫，并輕輕轉(zhuǎn)動(dòng)容器，使拋射劑緩緩全部釋出。供試品亦可采用其他適宜的方法取出。用無(wú)菌zhu射器從每一容器中吸出藥液于無(wú)菌容器中混合，然后取樣檢查。
貼膏劑供試品 取供試品，去掉防粘層，將粘貼面朝上放置在無(wú)菌玻璃或塑料器皿上，在粘貼面上覆蓋一層適宜的無(wú)菌多孔材料（如無(wú)菌紗布），避免貼膏劑粘貼在一起。將處理后的貼膏劑放入盛有適宜體積并含有表面活性劑（如聚山梨酯80或卵磷脂）稀釋液的容器中，振蕩至少30分鐘。必要時(shí)，用同一稀釋液將供試液進(jìn)一步10倍系列稀釋。
各品種項(xiàng)下規(guī)定的微生物限度標(biāo)準(zhǔn)解釋如下：
10^1cfu：可接受的*大菌數(shù)為20；
10^2cfu：可接受的*大菌數(shù)為200；
10^3cfu：可接受的*大菌數(shù)為2000，依此類(lèi)推。
若供試品的需氧菌總數(shù)、霉菌和酵母菌總數(shù)的檢查結(jié)果均符合該品種項(xiàng)下的規(guī)定，判供試品符合規(guī)定；若其中任何一項(xiàng)不符合該品種項(xiàng)下的規(guī)定，判供試品不符合規(guī)定。
稀釋液、沖洗液及培養(yǎng)基
見(jiàn)非無(wú)菌產(chǎn)品微生物限度檢查：控制菌檢查法（通則1106）。
含有一種以上的微生物培養(yǎng)物稱(chēng)為混和培養(yǎng)物(mixed culture)。如果在一個(gè)菌落中所有細(xì)胞均來(lái)自于一個(gè)親代細(xì)胞，那么這個(gè)菌落稱(chēng)為純培養(yǎng)(pureculture)。在進(jìn)行junzhong鑒定時(shí)，所用的微生物一般均要求為純的培養(yǎng)物。得到純培養(yǎng)的過(guò)程稱(chēng)為分離純化，方法有許多種。
1、傾注平板法
首先把微生物懸液通過(guò)一系列稀釋?zhuān)∫欢康南♂屢号c熔化好的保持在40-50℃左右的營(yíng)養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基充分混合，然后把這混合液傾注到無(wú)菌的培養(yǎng)皿中，待凝固之后，把這平板倒置在恒箱中培養(yǎng)。單一細(xì)胞經(jīng)過(guò)多次增殖后形成一個(gè)菌落，取單個(gè)菌落制成懸液，重復(fù)上述步驟數(shù)次，便可得到純培養(yǎng)物。
2、涂布平板法
首先把微生物懸液通過(guò)適當(dāng)?shù)南♂專(zhuān)∫欢康南♂屢悍旁跓o(wú)菌的已經(jīng)凝固的營(yíng)養(yǎng)瓊脂平板上，然后用無(wú)菌的玻璃guadao把稀釋液均勻地涂布在培養(yǎng)基表面上，經(jīng)恒溫培養(yǎng)便可以得到單個(gè)菌落。
3、平板劃線法
*簡(jiǎn)單的分離微生物的方法是平板劃線法。用無(wú)菌的接種環(huán)取培養(yǎng)物少許在平板上進(jìn)行劃線。劃線的方法很多，常見(jiàn)的比較容易出現(xiàn)單個(gè)菌落的劃線方法有斜線法、曲線法、方格法、fangshe法、四格法等。當(dāng)接種環(huán)在培養(yǎng)基表面上往后移動(dòng)時(shí)，接種環(huán)上的菌液逐漸稀釋?zhuān)笤谒鶆澋木€上分散著單個(gè)細(xì)胞，經(jīng)培養(yǎng)，每一個(gè)細(xì)胞長(zhǎng)成一個(gè)菌落。
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